大多為非線性：線性變化分子的比例相對於衰老過程中整體失調的分子而言相對較小（平均16.2%）。

多組學數據與年齡的關聯

• 組學數據與年齡的相關性：分析顯示，大部分組學數據與參與者年齡之間存在顯著相關性。
• 與年齡關聯最強的數據：代謝組學、細胞激素和口腔微生物組數據與年齡的關聯性最強。

分子變化模式

• 非線性變化模式：大多數分子模式呈現非線性變化，表明衰老不是一個線性過程。
• 三個重要集聚：  11個分子軌跡聚類，其中三個聚類（2、4和5）呈現出引人注目、簡單易懂的模式，跨越整個壽命。
• 集聚組成：這三個集聚中的大多數分子主要由轉錄分子組成。
• 集聚變化模式：
  
  • 聚類4：在約60歲之前相對穩定，之後迅速下降。
  • 聚類2和5：在60歲之前波動，然後急劇上升，並在約55-60歲出現上拐點。

並非更年期影響

• 更年期影響：雖然在分析前對混雜因素（包括性別）進行了校正，但女性更年期年齡範圍（45-55歲）與所有三個集聚的主要轉變點非常接近。
• 性別分析結果：男性和女性數據集都顯示出相似的集聚類，表明約55歲的轉變點並非僅歸因於女性更年期，而是兩性衰老過程中的共同現象。

轉錄組學數據的影響

• 額外集聚分析：進行了兩個額外的聚類分析，一個僅關注轉錄組學數據，另一個排除轉錄組學數據。
• 分析結果：兩個分析都產生了幾乎相同的三聚類配置，與使用完整組學數據集觀察到的結果一致。

功能分析

• 對三個集聚進行功能分析：對轉錄組學、蛋白質組學和代謝組學數據集進行了功能分析，以深入了解與非線性變化分子相關的生物學功能。
• 構建相似性網絡和模塊識別：使用來自各種數據庫（GO、KEGG和Reactome）的富集通路構建相似性網絡，並識別模塊以消除冗餘註釋。
• 集聚2的功能模塊：
  
  • 轉錄組學模塊：與GTPase活性（與細胞凋亡相關）和組蛋白修飾（在衰老過程中增加）相關。
• 集聚4的功能模塊：
  
  • 轉錄組學模塊：與氧化應激相關，包括抗氧化活性、氧載體活性、氧結合和過氧化物酶活性。
• 集聚5的功能模塊：
  
  • 轉錄組學模塊1：與mRNA穩定性相關，包括mRNA去穩定化、mRNA加工、mRNA分解代謝過程的正向調節和mRNA代謝過程的正向調節。
  • 轉錄組學模塊2：與自噬相關，在人類衰老過程中增加。

疾病風險的非線性增加

• 集聚2中的疾病風險：
  
  • phenylalanine苯丙氨酸代謝通路：與衰老相關的心臟功能障礙和苯丙氨酸分解代謝失調有關。
  • C-X-C基序趨化因子5（CXCL5或ENA78）：在動脈粥樣硬化中濃度較高。
  • 血液尿素氮臨床實驗室測試：表明腎功能在衰老過程中非線性下降。
  • 血清/血漿葡萄糖臨床實驗室測試：表明衰老是2型糖尿病的主要風險因素。
  • 心血管疾病、腎臟疾病和2型糖尿病的風險隨年齡增長但非線性增加，尤其是在60歲以後。
• 集聚4中的疾病風險：
  
  • 不飽和脂肪酸生物合成通路：減少，而不飽和脂肪酸有助於降低心血管疾病風險和維持大腦功能。
  • α-亞麻酸和亞麻酸alpha-linolenic acid and linolenic acid代謝通路：減少，而該通路可以減少衰老相關疾病。
  • 咖啡因代謝通路：減少，表明代謝咖啡因的能力在衰老過程中下降。
  • 細胞激素MCP1：在免疫調節中發揮重要作用。
• 集聚5中的疾病風險：
  
  • 平均紅細胞血紅蛋白和紅細胞分佈寬度臨床測試：表明與衰老過程相關的攜氧能力非線性下降。
• 集聚11的疾病風險：
  
  • 在50歲之前持續增加，然後下降到56歲，之後直到75歲沒有觀察到實質性變化。
  • 與DNA修復相關的轉錄組學模塊：包括雙鏈斷裂修復的正向調節、肽基-賴氨酸乙酰化和組蛋白乙酰化。
  • 這些pathway在基因組穩定性、基因表達和代謝平衡中至關重要，其水平在人類壽命中下降。
  • 表明在50歲之前DNA修復能力增強，在50至56歲之間顯著下降，然後穩定到75歲。

兩個峰值

• 發現數千個分子在衰老過程中呈現變化模式，形成不同的波動。
• 觀察到兩個顯著的峰值，分別發生在 45 歲和 65 歲左右。
• 這兩個峰值與先前僅包含蛋白質組學數據的研究結果一致。
• 峰值2與之前的軌跡集聚結果一致，表明大約 60 歲時出現轉折點。

峰值的穩健性與混雜因素影響

• 穩健性：使用不同的 q 值閾值和滑動窗口參數進行測試，結果一致地顯示相同的可檢測波動。
• 不受混雜因素影響：探討了混雜因素（如胰島素敏感性、性別和種族）是否在不同年齡範圍內的兩個峰值之間存在差異，結果顯示這些混雜因素在其他年齡段沒有顯著差異，進一步支持觀察到的兩個峰值差異歸因於年齡而非其他混雜變量的結論。

不同組學數據的年齡相關波動

• 兩個不同的峰值：大多數組學數據都表現出兩個不同的峰值，並且非常穩健。
• 蛋白質組學數據：在 40 歲和 60 歲左右出現兩個年齡相關的峰值，與先前研究結果 largely 一致。
• 衰老相關變化的系統性：多種類型的組學數據（包括轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學、細胞激素、腸道微生物組、皮膚微生物組和鼻腔微生物組）都表現出這些波動，通常與蛋白質組學數據具有相似的模式，支持了衰老相關變化不僅限於特定組學層，而是涉及跨越多個分子組分的協調和系統性改變的假設。

兩個峰值中失調分子的功能

• 心血管疾病風險：在峰值 1 和峰值 2 中都發現了與心血管疾病相關的幾個模塊，這與上述結果一致。
• 皮膚和肌肉穩定性：在峰值 1 和峰值 2 發現皮膚和肌肉穩定性失調增加，表明皮膚和肌肉的衰老在這兩個峰值明顯加速。
• 脂質和酒精代謝：在峰值 1 中發現與脂質和酒精代謝相關的特定模塊，表明脂質代謝和酒精代謝能力隨年齡增長而下降。
• 免疫功能障礙：在峰值 2 中觀察到與免疫功能障礙相關的顯著模塊，表明免疫系統在 60 歲時迅速衰退。
• 腎功能和碳水化合物代謝：在峰值 1 和峰值 2還發現了與腎功能和碳水化合物代謝相關的模塊，進一步證實了先前關於 60 歲左右腎功能下降和碳水化合物對衰老影響的觀察結果。